Владимир
Чернов
Иванович
заместитель директора
Доктор медицинских наук
Профессор
B-6789-2016
7201429550
108949
https://www.tnimc.ru/kontakty/personalii/tnimc/vladimir-ivanovich-chernov/
РОССИЯ
Вадим
Степанов
Анатольевич
Директор
РОССИЯ
2022-04-30
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики лейкоплакии и плоскоклеточного рака слизистой полости рта на дооперационном этапе. Сущность способа: проводят флюориметрическое определение химотрипсинподобной активности протеасом (ХТП) в сыворотке крови, для чего осуществляют забор крови из вены в две пробирки по 6 мл, через час после взятия крови ее центрифугируют в течение 15 минут при 3000 об/мин, полученную сыворотку предварительно активируют 10% SDS, далее ХТП определяют по гидролизу флуорогенного олигопептида Suc-LLVY-AMC (Sigma), утилизирующегося химотрипсинподобными центрами протеасом, для оценки активности примесных протеаз применяют специфический ингибитор протеасом - MG132 (Sigma), реакционная смесь для определения активности протеасом содержит 20 мМ Tris-HCl с рН 7,5, 1 мМ дитиотрейтола, 30 мкМ флуорогенного субстрата, 5 мМ MgCl2 и 1 мМ АТФ, реакцию проводят при 37°С в течение 20 мин, образовавшийся продукт регистрируется на многорежимном микропланшетном ридере-имиджере «Cytationl» (BioTek, CIIIA) при Exi = 360 нм, Emi = 460 нм, удельную активность протеасом выражают в единицах активности на 1 мл сыворотки крови, ХТП оценивают по интенсивности флуоресценции гидролизованного субстрата в единицах показаний флуориметра Eg/мл. При достижении значения показателя ХТП в диапазоне от 30,9 до 69,9 диагностируют лейкоплакию, а при определении значения в диапазоне от 70,0 до 126,4 диагностируют плоскоклеточный рак слизистой полости рта.
240.000
Акт внедрения №13 от 30.04.22